電化學(xué)技術(shù)為廢水處理和化學(xué)合成提供了一種清潔而強(qiáng)大的工具。（生物）電化學(xué)系統(tǒng)通過(guò)向微生物生長(zhǎng)的電極施加電勢(shì)來(lái)催化（微生物）轉(zhuǎn)化。微生物將施加的能量直接用作電子或間接用作氫，氫在陰極由電子和質(zhì)子形成。微電極傳感器有一個(gè)薄的尖端（低至1μm），這使得測(cè)量具有與尖端尺寸相同的空間分辨率。傳感器可以沿著輪廓軸移動(dòng)來(lái)測(cè)量梯度。微電極傳感器已經(jīng)應(yīng)用于許多不同的領(lǐng)域，包括生物化學(xué)，植物科學(xué)，微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)，但是它們?cè)陔娀瘜W(xué)系統(tǒng)中的應(yīng)用仍然有限。微電極傳感器在電化學(xué)系統(tǒng)中的應(yīng)用有望通過(guò)電流型微傳感器的應(yīng)用而變得合適，電流型微傳感器測(cè)量由微電極表面上的氧化還原反應(yīng)產(chǎn)生的電流信號(hào)。

在（生物）電化學(xué)系統(tǒng)中使用電位微電極分析局部梯度時(shí)，需要解決電場(chǎng)干擾問(wèn)題，解決該問(wèn)題的最佳方法是盡量減小傳感電極和參比電極之間的距離。在定制的傳感器中，參比電極和測(cè)量電極內(nèi)置在同一個(gè)傳感器中，并與導(dǎo)電液體相連。雖然這給出了可靠的結(jié)果，但較厚的微傳感器尖端不允許傳感器移動(dòng)超過(guò)600μm的距離而不穿透生物膜上毫米寬的孔。短距離足以測(cè)量2D電極上的生物膜內(nèi)部，但不能用于測(cè)量通常用于生物陽(yáng)極或生物陰極中的幾毫米或甚至厘米厚的3D多孔電極內(nèi)部。在本研究中，提出使用一種微電極感測(cè)器（unisense）應(yīng)用于開(kāi)發(fā)了（生物）電化學(xué)系統(tǒng)來(lái)測(cè)量電解液中的梯度，并首次測(cè)量整個(gè)多孔3D電極。方法開(kāi)發(fā)包括三個(gè)步驟。首先設(shè)計(jì)了一個(gè)反應(yīng)器，其關(guān)鍵功能允許在幾厘米范圍內(nèi)進(jìn)行微輪廓測(cè)量，保持厭氧條件和10 L/h的連續(xù)無(wú)泄漏液體電解質(zhì)再循環(huán)。實(shí)用技巧和方案以便于使用和小心處理微傳感器。第二，反應(yīng)器設(shè)計(jì)用于顯示H的微觀分布。第三，提出并驗(yàn)證了一種克服電位微傳感器測(cè)量過(guò)程中電場(chǎng)干擾的校正方法，利用該方法，電位微傳感器最終可以應(yīng)用于（生物）電化學(xué)系統(tǒng)中的梯度精確測(cè)量，即使在高電流（?10 kA/m）下也是如此）。校正方法用于顯示電場(chǎng)電位、ORP和pH的梯度分布。研究中的分布顯示電極表面的整體條件和局部條件之間存在顯著差異，這突出了所提出的方法的重要性及其在傳質(zhì)研究中的可能應(yīng)用。

Unisense微電極系統(tǒng)的應(yīng)用

將實(shí)驗(yàn)臺(tái)（LS18）、微操作器（MM33-2）、電機(jī)驅(qū)動(dòng)微操作器平臺(tái)（MMS）和電機(jī)控制器（MC-232）組合在一起，以精確操作微傳感器（Unisense）。H2微電極傳感器（H2-50），pH微電極（pH-50），氧化還原電位微電極（RD-50），參比微電極（REF-100）和電位電極（EP-100）用于微成型，所有尖端尺寸均為40-60μm（全部來(lái)自Unisense，在宏觀下確定相對(duì)傳感器長(zhǎng)度，以能夠在圖中組合不同的傳感器測(cè)量。對(duì)于電位微傳感器，將兩個(gè)外部毛細(xì)管安裝在5mm以上和反應(yīng)器中陰極下方7mm處，毛細(xì)管填充有凝膠化的3M KCl，并通過(guò)填充有液體3M KCl的管道連接到Ag/AgCl參比電極。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

unisense微傳感器在電化學(xué)系統(tǒng)中測(cè)量梯度的成功應(yīng)用。反應(yīng)器的測(cè)量井垂直于剖析方向，允許剖析電解液無(wú)泄漏再循環(huán)條件。所提供的手冊(cè)和視頻說(shuō)明將幫助未來(lái)的用戶(hù)應(yīng)用這種方法。分析了電解質(zhì)中的局部H2、電勢(shì)、pH和ORP，并首次在整個(gè)多孔電極中進(jìn)行了分析。對(duì)于電位型微傳感器，局部電場(chǎng)電位校正是一種可靠的校正電場(chǎng)擾動(dòng)的方法。這些傳感器的應(yīng)用可以擴(kuò)展到電化學(xué)系統(tǒng)中生物膜梯度和局部反應(yīng)器條件的研究。

圖1、帶有再循環(huán)、流入液、流出液和pH值控制的電化學(xué)槽的設(shè)置。陽(yáng)極電解液再循環(huán)以綠色顯示，便于查看。

圖2、在（生物）電化學(xué)反應(yīng)器中制作微輪廓的裝置。將電化學(xué)反應(yīng)器放置在升降板（D）上，該升降板以17°傾角（A）連接到接地板上。為了制作微輪廓，將微傳感器放置在馬達(dá)工具頭夾（B）中，并通過(guò)套筒（C）進(jìn)入反應(yīng)器。為了測(cè)量微剖面圖，陰極電解液循環(huán)被短暫停止，以"套管"（圖二C）進(jìn)入微傳感器。用硅脂潤(rùn)滑微傳感器頸部，以確保頸部和套管之間的水密密封。硅脂允許電解質(zhì)無(wú)泄漏地移動(dòng)傳感器。在將微傳感器固定在套管中之后，再次打開(kāi)再循環(huán)，并且可以形成微剖面，在此期間，使用電動(dòng)工具（默認(rèn)速度和加速度為1000μm/s和1000μm/s）將微電極傳感器取下，步長(zhǎng)為100μm）（圖二B）刺穿石墨電極，并通過(guò)陰極層形成梯度，直至插入到電池內(nèi)的膜。

圖3、在-200 mA和無(wú)電流條件下，兩個(gè)電化學(xué)反應(yīng)器（1和2）內(nèi)氫濃度隨距離變化的曲線(xiàn)圖，左圖為反應(yīng)器示意圖，每個(gè)反應(yīng)器（1和2）繪制了兩次曲線(xiàn)圖。在沒(méi)有電流施加到電化學(xué)電池的情況下，沒(méi)有檢測(cè)到氫氣。在施加電流的情況下，最靠近反電極的陰極電解液中的氫濃度低（圖三20-25mm的距離），并且在最靠近反電極的陰極處最高。

圖4、pH微傳感器測(cè)量（A）在不同的陰極電流幅值下，本體pH值與由放置在陰極室的本體入口點(diǎn)處的pH微傳感器報(bào)告的pH值之間的偏差，相對(duì)于頂部固定的參比物測(cè)量pH信號(hào)。（B，C）在-50 mA下運(yùn)行的電化學(xué)反應(yīng)器內(nèi)pH值隨距離變化的曲線(xiàn)。相對(duì)于頂部固定的參比電極測(cè)量pH值，相對(duì)于底部固定的參比電極測(cè)量pH值兩次。（B，黑色）和底部（B，黃色）參比電極用EP頂部校正（B，綠色）和底部（B，淺藍(lán)色）參考曲線(xiàn)，以獲得校正的pH曲線(xiàn)還用開(kāi)孔測(cè)量pH曲線(xiàn)（C，藍(lán)色）。在形成pH頂部參考曲線(xiàn)之后，立即將pH微傳感器尖端放置在底部參考電極旁邊，并記錄7分鐘（C，黃色十字）。當(dāng)沒(méi)有電流施加到系統(tǒng)時(shí)，在再循環(huán)pH和微傳感器pH（圖六A）。在施加電流的情況下，pH微傳感器報(bào)告的pH值低于再循環(huán)pH值。這種偏移隨著電流的增加而增加，呈半線(xiàn)性趨勢(shì)。在-100 mA或更負(fù)的電流值下，pH微傳感器甚至報(bào)告負(fù)pH值。因此，信號(hào)與施加電流的再循環(huán)pH值嚴(yán)重偏離。

圖5、氧化還原電位的重復(fù)曲線(xiàn)在-200 mA下運(yùn)行的電化學(xué)反應(yīng)器內(nèi)的距離上的氧化還原電位（ORP）。氧化還原電位是相對(duì)于頂部固定的參比電極測(cè)量的。氧化還原電位測(cè)量的原始數(shù)據(jù)是相對(duì)于頂部參比電極測(cè)量的。（A，黑色和灰色）使用EP頂部參考輪廓進(jìn)行校正（A，綠色）以獲得校正的ORP曲線(xiàn)（B，紅色）。用開(kāi)池電壓測(cè)量ORP分布在不同的反應(yīng)器（1和2）中進(jìn)行兩次重復(fù)測(cè)量，并且出于觀察的目的僅示出了來(lái)自一個(gè)反應(yīng)器（1）的陰極位置。

結(jié)論與展望

本研究開(kāi)發(fā)了一種基于使用微傳感器測(cè)量pH和H2的技術(shù)梯度在微生物電合成。使用三維電極（生物）電化學(xué)系統(tǒng)可能導(dǎo)致從本體條件到電極的梯度的出現(xiàn)。由于這些梯度（例如，關(guān)于pH和反應(yīng)物/產(chǎn)物濃度）決定電極的性能，因此能夠準(zhǔn)確地測(cè)量它們是至關(guān)重要的。除了這些參數(shù)之外，還測(cè)定了電解液中和整個(gè)3D多孔電極中的局部氧化還原電位和電場(chǎng)電位。關(guān)鍵是認(rèn)識(shí)到電場(chǎng)的存在干擾了通過(guò)電位型微傳感器(unisense)獲得的測(cè)量結(jié)果。為了克服對(duì)pH測(cè)量的干擾，驗(yàn)證了一種用電位微傳感器測(cè)量系統(tǒng)（unisense）局部電場(chǎng)來(lái)校正信號(hào)的方法，該方法為電極設(shè)計(jì)、反應(yīng)器工程、電活性生物膜梯度測(cè)量以及（生物）電化學(xué)系統(tǒng)三維多孔電極內(nèi)部和周?chē)牧黧w動(dòng)力學(xué)研究提供了有用的工具。